væskekromatografi med høy ytelse (HPLC) er en vanlig metode for laboratorieanalyse hvorved en prøve blir separert i sine kjemiske bestanddeler som er sendt gjennom en kolonne . Kolonnen er fylt med en porøs pakning typisk basert på behandlet kiselgel. En standard revers -fase-kolonne , for eksempel en C8 , kan noen ganger bli tilstoppet eller forurenset. Slike søyler kan ofte bli regenerert ved hjelp av noen få enkle teknikker. Du trenger
HPLC instrument
Vann
Metanol
Acetonitrile
Isopropanol
Metylenklorid
heksan
Vis flere instruksjoner
Regenerating en kolonne
en

Løsne foulet kolonnen og reversere sin posisjon , slik at den mobile fasen går nå inn i det som er normalt utgangen av kolonnen . Fest en exit linjen til den andre enden av kolonnen ( den enden som var opprinnelig innløpet ) , og kjør dette i en avfallsbeholder .
2

Pump gjennom en rekke løsemidler etter synkende polaritet . En grunnleggende anbefalte serie er å starte med metanol, deretter videre gjennom acetonitril , acetonitril /isopropanol ( 75:25 ) , isopropanol , metylenklorid og heksan. Dersom den mobile fase som opprinnelig satt i kolonnen var en buffer , bør en vask med vann forut for metanol. En strømningshastighet på 1 til 2 milliliter per minutt er vanligvis egnet, og omtrent 10 kolonnevolumer av hver løsemidler kan pumpes gjennom . Kolonnen volum er det indre rommet ikke opptas av pakningen og er beregnet som ( 0,7 x pi x (ID /2) ^ 2 x L), hvor ID er kolonnens indre diameter og L er dets lengde.


3

Pump ytterligere 10 kolonne volumer av isopropanol gjennom kolonnen for å forberede den for bruk sammen med den originale mobile fasen . Hvis den opprinnelige mobile fase ble bufret , også pumpe vann gjennom kolonnen etter at isopropanol før den går tilbake til den opprinnelige bufret mobil fase .
4.

Koble fra kolonnen og reversere og koble den slik at den er i dens normal konfigurasjon ( det vil si med den mobile fase ble pumpet inn i kolonnen innløp ) . Koble utløpet av kolonnen til detektoren.