CFSE , eller karboksyfluorescens - succinimidyl - ester , er et fluorescerende cellefarging løsning som brukes i lymfocyttmigrering studier. Lymfocytter er de blodets hvite celler som har evnen til å flytte ut av blodet til å fange fremmede mikroorganismer , spiller en viktig rolle i immun - forsvar . CFSE kan også brukes til å merke thymocytter og embryonale celler , i henhold til " Immunology and Cell Biology ". Menneskelige Lymphocite Farging Protocol

Teknikere forberede en celle suspensjon med 20 millioner celler per ml i 0,1 prosent kalvefosterserum ( FBS ) og fosfat saltløsning ( PBS ) . De legger CFSE og la suspensjon sitte i åtte minutter , ifølge The University of Kansas Medical Center. Forvarmes FBS blir deretter tilsatt og cellene blir inkubert i et vannbad ved 98,6 grader Fahrenheit i 10 minutter. Cellene blir deretter sentrifugert i fem minutter, supernatanten kassert og cellene blir vasket i en oppløsning av 2 prosent FBS /PBS tre ganger. Cellene er festet med paraformaldehyd .
Bilder Forenklet CFSE Farging Protocol

Teknikere sentrifuger blodprøver , eliminere de røde blodcellene . Senere , vasker de lymfocyttene med PBS for å fjerne fritt protein. For å kunne observere celledeling etter to dager, er CFSE tilsatt i lave konsentrasjoner i åtte minutter , hvoretter reaksjonen blokkert med føtalt kalveserum . Celler blir vasket to ganger med PBS /FCS . Denne protokollen kan brukes i "in vivo " eller " in vitro " eksperimenter , ifølge The Hedrick Lab ved University of California.
Protokoll for aktivering av naive CD8 T- celler i vitro

en naiv T-celler er en lymfocytter som har differensiert i benmargen. Dette celletype er moden , og cellene reagerer på nye patogener at immunforsvaret har aldri støtt på. Teknikere ruge Influensa virus og celleprøver på is i 30 minutter , sentrifuger og fortsette inkubasjon prosess for 18 timer ved 98,6 grader Fahrenheit. Senere blir celler farget med CFSE og resultatene er analysert i henhold flowcytometri .