LacZ er en bakteriell genet som produserer enzymet beta - galactosidase , som bryter ned laktose til glukose og galaktose . Enzymet spalter også forbindelsen X -gal , som gir en blå farge som molekylærbiologer bruk som en markør eller reporter for å spore tilstedeværelsen av lacZ- genet i cellene. Transfeksjon

Forskere knytter LacZ genet med et gen av interesse, for eksempel insulin , med et fragment av DNA kalles et plasmid . De bruker kjemiske eller elektriske transfeksjonsmetoder å få plasmid inn i cellene. Cellene blir analysert for LacZ ekspresjon av beta- galaktosidase , som også vil markere tilstedeværelsen av insulin genet.
Fiksering

Etter transfeksjon , blir cellene dyrket på en plast petriskål . For analysen , blir vekstmediet fjernet og cellene ble vasket med fosfatbufret saltvann (PBS) . En frisk fiksering oppløsning av formaldehyd , metanol og glutaraldehyd er benyttet til å feste cellene i to minutter. Den bindemiddel fjernes og cellene vasket igjen med PBS .
X -gal

En frisk flekker løsning som inneholder X -gal , kalium ferri - cyanid og kalium- ferro - cyanid tilsettes til cellene over natten. Cellene er vasket igjen med PBS , og hvis LacZ genet er til stede, vil beta - galactosidase har spaltes X -gal og cellene vil være blå .